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拉曼显微镜的分析点(激光光斑)的大小是多少?
发布时间:2021-02-26 09:20:26 浏览: 72次 来源:【jake推荐】 作者:-=Jake=-

拉曼显微镜的分析点(激光光斑)的大小是多少?

拉曼显微镜的激光光斑尺寸主要由两个因素决定,一个是激光波长,另一个是所使用的显微镜​​物镜的数值孔径。可以达到的最小光斑尺寸是衍射极限。根据光学定律真人游戏 ,激光光斑直径D可以表示为:

D = 1. 22λ/ NA

大光斑_衍射极限光斑尺寸_突破衍射极限

其中银河国际 ,λ是激发激光的波长亚博app ,NA是所用显微镜物镜的数值孔径。例如,使用数值孔径为0. 90且放大倍数为100的显微物镜99体育 ,波长为532 nm的激光的光斑直径理论上为721 nm。

从该公式可以看出,较短的激光波长可以提供更高的空间分辨率(也就是说,在相同的显微镜物镜下,488 nm蓝色激光的光斑比785 nm近红外激光的光斑更好)同样,数值孔径较大的显微镜物镜可以提供更高的空间分辨率(也就是说,当使用相同波长的激光时衍射极限光斑尺寸,数值孔径0. 90的物镜具有比数值孔径小的点)。 k1] 55的物镜较小)。

对上述公式稍加修改衍射极限光斑尺寸,就可以得到光学显微镜在衍射极限下可以达到的空间分辨率R的极限:

大光斑_突破衍射极限_衍射极限光斑尺寸

R = 0. 61λ/ NA

对于532 nm激光和数值孔径0. 90的物镜,理论空间分辨率为361 nm。但是,该公式适用于标准光学显微镜,并且在拉曼显微镜中实际发生的光学过程要复杂得多。例如,激光光子和拉曼光子的散射以及它们与样品表面的相互作用会导致空间分辨率降低。因此,通常认为拉曼的空间分辨率约为1微米乐鱼官网 ,对于某些“高质量”样品,空间分辨率可能接近衍射极限。

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